Embriologie (Assisted Hatching, IMSI, FISH, Fragmentation ADN)

Les biologistes du laboratoire,  expérimentés et hautement qualifiés ayant effectué de nombreuse recherches et plusieurs publications, restent attentifs aux particularités de chaque couple de façon à leurs apporter des services scientifiques de haut niveau.

Le laboratoire d’embryologie étant à la pointe de la technologie, possède les systèmes de culture embryonnaire les plus sophistiqués, assurant des taux de grossesse systématiquement élevés et offrant le meilleur de la médecine contemporaine dans ce domaine.

Le laboratoire est équipé d’un système spécial pour l’enregistrement de la température, du CO2 et des niveaux de pH de tous les incubateurs d’embryons et des matériaux de culture afin de surveiller en continu et en temps réel le fonctionnement régulier et ininterrompu de tous les équipements du laboratoire. De plus, celui-ci dispose d’un système spécial pour l’enregistrement continu des conditions de température, d’humidité et de particules organiques dans toute la zone du laboratoire, assurant ainsi un environnement de qualité supérieure pour les processus de FIV et de culture d’embryons. Ces systèmes spéciaux d’enregistrement sont actifs 24 heures sur 24, 7 jours sur 7, et pendant les jours ou nous sommes fermés, ils sont connectés à un système d’Alerte spécial qui avertit le Biologiste de garde pour tout problème pouvant survenir.

Le stockage d’ovocytes, d’embryons et de spermatozoïdes congelés s’effectue dans des récipients d’azote liquide comportant des capteurs spécifiques qui contrôlent la température en continue.

En outre, notre laboratoire d’embryologie et notre clinique dans son ensemble disposent d’un système de suivi entièrement automatisé pour tous les matériaux et procédés biologiques de nos patients, un système informatique de pointe nommé Cosmos.

Techniques avancées de reproduction assistée:

Chaque cas d’infertilité traité par IAKENTRO est unique! En suivant cette approche, nous appliquons plusieurs techniques contemporaines et personnalisées pour augmenter le taux de réussite de chaque couple.

Eclosion assistée d’embryons (Assisted Hatching)

Les embryons au cours des premiers stades de leur développement, sont entourés d’une enveloppe extérieur appelée la zone transparente et qui protège les cellules embryonnaires. Par la suite entre le 5eme et le 6eme jour de leur division lorsque l’embryon se retrouve dans l’utérus cette zone se dissous a un certain endroit (éclosion) de façon à s’implanter dans l’endomètre et de continuer à croître.

Dans certains cas de fécondation in vitro des embryons il est nécessaire d’aider cette éclosion en réduisant l’épaisseur de la zone transparente. Ce procédé est effectué le jour du transfert d’embryons et est fait en utilisant un laser spécial. De cette façon, on augmente considérablement les chances d’implantation de l’embryon dans l’utérus.

L’éclosion assistée d’embryons avant le transfert est recommandée pour:

• Les femmes ayant plus de 37 ans
• Les embryons congelés
• Les femmes répondant “faiblement” aux hormones (poor responders)
• Les femmes ayant un taux de FSH supérieur a la normale

Injection intra-ovocytaire de spermatozoïdes morphologiquement sélectionnés(IMSI)

La sélection des spermatozoïdes à utiliser pour la fertilisation des ovocytes du couple est basée sur les critères de morphologie et de mobilité du sperme. Cependant pour certain couples cette évaluation n’est pas suffisante. Plus précisément dans des cas important d’infertilité masculine qui ont rapport a une mauvaise morphologie a) de l’échantillon qui entraine un taux bas de fertilisation ou b) mauvaise qualité des embryons lors de tentatives précédentes ou en cas de fausse couche a répétition la méthode de sélection des meilleurs spermatozoïdes morphologiquement est effectuée puis ils sont introduit dans les ovocytes. Cette méthode offre un avantage supplémentaire par rapport à la méthode ICSI car elle permet une sélection plus détaillée des spermatozoïdes grâce à un microscope spécial à très haute résolution. Les meilleurs spermatozoïdes sont choisis en fonction de certains critères morphologiques. De cette façon, on estime que la meilleure morphologie du sperme est associée à un meilleur développement et une meilleure qualité de l’embryon et entraîne éventuellement un taux de grossesse plus élevé.

Hybridation fluorescente des spermatozoïdes (FISH du sperme)

Dans plusieurs cas, les multiples échecs de grossesse ou les fausses couches à répétition peuvent cacher des anomalies génétiques ou chromosomiques liées au  sperme du conjoint. Ces anomalies lors de la fécondation de l’ovocyte et de la fusion des noyaux sont également transférées au matériel génétique du fœtus, et dans des cas d’aneuploïdie chromosomique sévère peuvent être la cause d’une fausse couche.

De quelle façon cette technique est appliquée aux spermatozoïdes
L’échantillon de sperme après évaluation de tous les paramètres (concentration, mobilité, morphologie) est ensuite lavé puis isolé afin d’effectuer la technique. Des sondes fluorescentes spéciales sont utilisées pour l’examen FISH qui s’attachent à des zones de l’ADN sur les chromosomes. De cette façon, grâce a la fluorescence des sondes, toute aneuploïdie est détectée dans les 12 chromosomes examinés et le résultat est donné en terme de pourcentage.

Les résultats de cette technique sont assez précis et peuvent révéler, par exemple, un taux anormal d’aneuploïdie dans le chromosome Y, qui peut être associé à une anomalie génétique provoquant une azoospermie chez l’homme. Le médecin évalue les résultats et, en fonction du taux d’aneuploïdie et des chromosomes où il se trouve, il accompagnera le couple vers la méthode de FIV la plus appropriée.

Vérification de la fragmentation de l’ADN du sperme (DNA fragmentation)

Des études récentes ont montré que l’augmentation des niveaux de fragmentation de l’ADN du sperme, a un niveau de stress oxydatif élevé, pourrait être la cause de l’absence de grossesse chez le couple. Ces études montrent que dans les échantillons de sperme où le pourcentage de spermatozoïdes atteints de dommages à l’ADN est supérieur à 30%, la probabilité de grossesse est significativement réduite

Cette analyse (DNA fragmentation) est recommandée:

• Pour les couples ayant subit plus de 3 échecs consécutifs de FIV
• Dans les cas de fécondation in vitro ou l’on observe un arrêt du développement des embryons dès les premiers jours de fécondation
• Dans les cas de fausses couches à répétition
• Dans les cas d’infertilité inexpliquée

L’examen du niveau de fragmentation de l’ADN du sperme n’a pas de rapport avec les paramètres examinés dans un spermogramme. Par conséquent, les échantillons ayant une concentration de sperme, une mobilité et une morphologie en apparence normales peuvent avoir des taux accrus de fragmentation de l’ADN et vice versa.

En cas de résultat démontrant une pathologie, le traitement recommandé pour l’homme est l’administration de médicaments antioxydants pendant une période d’au moins 90 jours. S’il n’y a pas d’amélioration post-traitement, une biopsie testiculaire ou une aspiration de sperme (TESE ou FNA) peuvent être nécessaire pour que l’ADN des spermatozoïdes obtenus ait un degré moindre de lésions.

Puces novatrices de sélection de sperme pour réduire la fragmentation de l’ADN des spermatozoïdes

La fragmentation de l’ADN des spermatozoïdes s’est révélée être en corrélation avec des taux de grossesse réduits car les techniques d’isolement et d’enrichissement de sperme jusqu’ici connues ne sont pas capables d’isoler les spermatozoïdes ayant un faible indice de dégradation des gènes (DNA fragmentation).

Afin d’éliminer la limitation ci-dessus, une nouvelle méthode de sélection et d’enrichissement du sperme est proposée, l’appareil de tri des spermatozoïdes.

Il s’agit d’une puce micro fluidique jetable où les spermatozoïdes fonctionnels sont isolés directement de l’échantillon de sperme brut, fournissant une population enrichie de spermatozoïdes normaux avec amélioration de tous les paramètres biologiques, ainsi que la fragmentation de l’ADN.

Cette puce innovante de tri du sperme:

• Fonde son action sur la dynamique micro fluidique (microfluidics)  en imitant la manière naturelle de guider les spermatozoïdes dans l’ovocyte à travers le mucus cervical, l’utérus et les trompes de Fallope. Les spermatozoïdes normaux et fonctionnels passent dans la puce à travers les micropores, par opposition aux spermatozoïdes morts ou a ceux qui sont moins mobiles ou qui souffrent d’anomalies morphologiques.
• Après le dépistage, l’échantillon présente une meilleure morphologie et une meilleure mobilité ainsi qu’une fragmentation de l’ADN moindre et des niveaux inférieurs de ROS que l’échantillon original.
• Élimine les effets nocifs (ROS) des méthodes conventionnelles de séparation du sperme et ne nécessite aucun prétraitement de l’échantillon, empêchant le risque de contamination.
• Fournit l’échantillon final en seulement 30 minutes réduisant ainsi le temps de préparation.