De plus, pour les problèmes d’infertilité masculine, l’injection intra-cytoplasmique de spermatozoïdes « ICSI » (IntraCytoplasmic Sperm Injection) en combinaison avec la méthode TESE-FNA (Testicular Sperm Extraction – Fine Needle Aspiration) sont les seules options pour traiter ces problèmes.
Indications pour la fécondation in vitro
Pour l’homme
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Problèmes au niveau du sperme
Pour la femme
- Problème des trompes
- Ovulation difficile
- Endométriose
- Infertilité inexpliquée
Contrôle préliminaire du couple
Avant de commencer un processus de FIV, il est nécessaire que le couple effectue les examens suivants:
Pour la femme:
- Contrôle hormonal de la reproduction et de la thyroïde (FSH, LH, E2, Prolactine, TSH, PRG, Testo, DHEA-S, Τ3, Τ4, )
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AMH: Hormone anti mullerienne (Indicateur du niveau de la réserve ovarienne utile pour choisir le protocole approprie pour la stimulation ovarienne)
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Anti-TPO, anti-TG
- Hystérosalpingographie
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Echographie gynécologique
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Test de transfert embryonnaire (une dilatation du col est recommandée en cas de lumière cervicale étroite ou distordue)
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Hystéroscopie (dans les cas où cela est nécessaire)
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Analyses générales de sang et d’urine
- Groupe sanguin – Rhesus
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Electrophorèse de l’hémoglobine pour exclure l’anémie méditerranéenne.
- Sérologies (Hépatites Β& C, HIV, VDRL)
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Examens préventifs (Mycoplasmes, Chlamydia, CMV, Toxoplasme, Herpès)
Pour l’homme:
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Spermogramme et culture de sperme
- Analyses générales de sang
- Groupe sanguin – Rhesus
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Electrophorèse de l’hémoglobine pour exclure l’anémie méditerranéenne.
- Sérologies (Hépatites Β& C, HIV, VDRL)
En cas d’azoospermie non occlusive ou d’oligo-athérospermie sévère avec une concentration de spermatozoïdes inférieure à 5 millions par ml, des tests supplémentaires sont demandes :
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Control pour la mucoviscidose
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Control pour les micros délétions du chromosome Y
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Caryotype pour déceler des anomalies arithmétiques ou structurelles des chromosomes
Protocoles de stimulation ovarienne pour les FIV
Cycle naturel
Stimulation ovarienne modérée avec déclenchement de l’ovulation
Stimulation contrôlée des ovaires,
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Protocole long avec agoniste
- Protocole court avec antagoniste
IVM (in vitro maturation)
Stades de la fécondation in vitro:
- Stimulation controlee des ovaires
- Aspiration des ovocytes
- Elaboration du sperme
- Fecondation des ovocytes
- Culture embryonnaire
- Transfert intra-uterin d’embryon
- Congelation des embryons surnumeraires
Stimulation contrôlée des ovaires
Dès sa naissance la femme possède la totalité de ses ovocytes ( ± 1 million ) qui vont être utilisés pendant l’ensemble de sa vie reproductive. Ce chiffre va progressivement diminuer et à l’âge de menarche il reste 450.000 ovocytes. Pour chaque cycle menstruel la femme dépense entre 600 et 1000 ovocytes/cycles même si l’ovocyte qui va ovuler sera un ou nul. Le reste des ovocytes du cycle seront détruits par apoptose.
Le but de la stimulation contrôlée des ovaires est la maturation de plusieurs ovocytes sur le cycle actuel (menstruel). Pour obtenir plusieurs ovocytes matures (capables d’ovuler) dans un cycle menstruel il faut administrer des hormones gonadotropes (FSH & LH) combinées avec GnRH agonistes (protocol long) ou GnRH antagoniste (protocol court). La réponse ovarienne concernant le nombre d’ovocytes matures qu’on peut obtenir avec la stimulation hormonal dépend de l’âge de la femme.
La durée de la stimulation hormonale des ovaires avec des gonadotrophines est de 9 à 12 jours en fonction de la réponse ovarienne. La stimulation commence au 2eme ou 3eme jour du cycle après avoir fait un dépistage échographique des ovaires pour s’assurer qu’il n’y a pas de présence de kystes. Le dosage hormonale administre va être modifie tous les 3 ou 4 jours d’après les taux d’œstradiol dans le sang, le nombre et le diamètre des follicules. Le jour où les follicules ont un diamètre médian d’au moins 18mm et sont plus de trois la gonadotrophine chorionique hCG est administrée afin de déclencher la maturation et en suite l’aspiration des ovocytes contenu dans les follicules. L’aspiration des ovocytes aura lieu 32 à 36 heures après la hCG c’est à dire quelques heures avant l’ovulation spontanée. Pour éviter une ovulation précoce indésirable durant la stimulation, les GnRH agonistes ou antagonistes sont administres en même temps que les hormones. Sur le plan pratique la différence entre agonistes et antagonistes est que les agonistes doivent être administres dès le 20eme jour du cycle précédent sans arrêt, tous les jours jusqu’au jour de l’hCG (protocol long) tandis que l’administration des antagonistes commence le 6eme jour de stimulation jusque au jour d’hCG (protocol court). Les deux protocoles donnent le même taux de grossesse. Le privilège du protocol court est la possibilité de mieux gérer les cas à risque d’hyperstimulation ovarienne.
Ponction ovocytaire
La ponction des follicules pour aspirer les ovocytes est effectuée sous anesthésie légère (sédation) en combinaison avec une analgésie locale para cervical de l’utérus. La ponction se fait par voie vaginale à l’aide de la sonde vaginale de l’échographe laquelle possède un guide pour l’aiguille de ponction. Cette aiguille est de diamètre 17G et pendant l’insertion dans la cavité péritonéale peut être aperçue sous contrôle échographique. Comme ça la ponction des follicules se fait sous contrôle échographique continue et le liquide aspire est donne aux biologistes pour qu’ils recherchent l’ovocyte contenue à l’intérieur.
La durée de la ponction folliculaire est de 10 à 15 minutes dans la salle d’opération et ensuite la femme est accompagnée dans sa chambre pour se reposer et elle y reste pour une petite heure. Apres avoir eu un entretien d’information avec nos biologistes et la sagefemme concernant le nombre et la qualité des ovocytes collectes ainsi que sur le traitement qu’elle doit suivre après la récolte des ovocytes afin de mieux préparer l’utérus pour l’implantation des embryons, le couple peut partir sans problèmes.
Les ovocytes aspires sont mis dans des petites boites nommées petri dishes qui contiennent un milieu de culture spécial et qui sont ensuite mises dans les incubateurs pour 4 à 6 heures afin que les actes métaboliques nécessaire pour la maturation des ovocytes soient complétés avant l’insertion des spermatozoïdes.
Récolte et traitement du sperme
L’échantillon de sperme récolté par masturbation est soumis à un traitement spécifique visant à améliorer la concentration et la mobilité du sperme, ainsi qu’à rejeter toute substance toxique. Initialement, l’échantillon est centrifugé et par la suite est soumis à la méthode de densité graduée (Percoll) afin de sélectionner les meilleurs spermatozoïdes en termes de viabilité et de mobilité.
Dans des cas particuliers, il est possible d’utiliser un échantillon de sperme cryoconservé du conjoint, qui a été recueilli au préalable. Pour les cas d’azoospermie, la biopsie testiculaire est réalisée avec la méthode FNA (Biopsie avec une aiguille très fine) ou TESE (biopsie tissulaire ouverte), sous analgésie locale et anesthésie légère. Dans le matériel de la biopsie on recherche la présence de spermatozoïdes immatures ou matures afin de les utiliser pour fertiliser les ovules. Notre clinique a été l’un des premiers centres au monde à utiliser des formes séminales de spermatozoïdes (spermatide) et a ainsi réalise la naissance du quatrième enfant au monde par spermatide. Ces résultats ont été publiés dans le journal médical Human Reproduction.
Fertilisation
La technique de fécondation appliquée dépend des caractéristiques de l’échantillon de sperme (concentration, mobilité, morphologie), du nombre d’ovocytes prélevés et de des antécédents de fertilité du couple. Les deux techniques appliquées sont la FIV classique et la micro-fertilisation (ICSI).
Fertilisation conventionnelle-FIV classique
Cette méthode est appliquée lorsque les valeurs de tous les paramètres du sperme (concentration, mobilité, morphologie) se trouvent à des niveaux normaux. Avec cette méthode, les ovocytes sont cultivés avec quelques centaines de milliers de spermatozoïdes tout au long de la nuit.